如果没有生物学重复怎么办?了解伪replicates
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针对ATAC_seq、chip_seq等蛋白质富集类实验而言,配置生物学重复具有重要意义。借助IDR软件对多个生物学重复的peak calling结果进行整合,有助于获得更为稳定且更具代表性的peak集合。生物学重复的重要性无需赘述,然而在某些特殊样本的情况下,确实存在无法获取生物学重复的情形,此时应如何应对?
可借鉴Encode所提供的ATAC分析流程,在数据层面构建一个模拟的“伪”生物学重复。其核心理念在于随机抽样,即从整体数据中随机选取一定比例的reads。例如,若随机抽取50%的reads,并进行两次独立抽样,则可生成两个类似生物学重复的数据集,进而开展后续分析。具体操作步骤如下,需依赖两个运行于Linux系统下的工具
shuf命令功能解析
此指令的功能是将文件内的内容进行随机排列后呈现,例如某文件中的信息排列方式可能如下
cat a.txt
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利用shuf命令能够实现对数据顺序的随机化处理
shuf a.txt
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